伏馬毒素免疫親和柱的試驗原理及檢測步驟

　　伏馬毒素免疫親和柱適用范圍及性能:

　　用于定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的伏馬毒素（FB）時的樣品前處理。

　　伏馬毒素免疫親和柱的試驗原理:

　　本產品凈化的基礎是抗原抗體反應，伏馬毒素單克隆抗體連接在柱內凝膠介質上，樣品中的伏馬毒素經過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過，在免疫親和柱內，伏馬毒素與抗體結合，洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質。后采用甲醇-乙酸洗脫伏馬毒素，然后進行相關分析。

　　伏馬毒素免疫親和柱的檢測步驟

　　l．樣品制備

　　將固體樣品按四分法縮分至1kg，全部用谷物粉碎機磨碎并磨細至粒度小于1mm,混勻分成2份作為試樣，分別裝入潔凈的容器內，密封，標識后置于4℃下避光保存。玉米油樣品直接取2份作為試樣，分別裝入潔凈的容器內，密封，標識后置于4℃下避光保存。

　　2．試樣提取

　　準確稱取固體樣品5g(精確至0.01g)于50mL離心管中，加入20mL乙腈-水溶液(50+50)，渦旋或振蕩提取20min，取出后，在4000r/min下離心5min，將上清液轉移至另一離心管中。玉米油樣品操作同固體樣品，提取液在下層。

　　3．試樣凈化

　　取2mL提取液，加入47mL吐溫-20/PBS溶液，混合均勻后過免疫親和柱，流速控制在1～3mL/min，用10mLPBS緩沖液淋洗免疫親和柱，分別用1mL甲醇-乙酸溶液(98+2)洗脫免疫親和柱三次，收集洗脫液，55℃下氮吹至干，加入1mL乙腈-水溶液(20+80)溶解殘渣。渦旋30s，過0.45um微孔濾膜后，收集于進樣瓶中，待測。

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